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A3600 pGEM-T Promega试剂

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A3600 pGEM-T Promega试剂
规格:1.2ug
上海桥星现货供应进口透析袋,密理博ECL发光液,B27无血清培养基,N2培养基,紫外酶标板,Gibco胶原酶,Trizol一步法试剂,反转录酶试剂盒,脂质体2000转染试剂,Roche原装潮霉素B,欢迎各单位及采购。

产品型号:

联系方式

86-021-65672052

产品先容

A3600 pGEM-T Promega试剂?

原装正品,质量保证,现货供应

规格:1.2ug

A3600 pGEM-T Promega试剂? 产品描述:

组分:

 

pGEM®-T Vector【子货号:A362A,包装:1 x 1.2μg,,运保温度:-20℃】

Control Insert DNA【子货号:A363A,包装:1 x 12μl,,运保温度:-20℃】

2X Rapid Ligation Buffer【子货号:C671A,包装:1 x 200μl,,运保温度:-20℃】

T4 DNA Ligase【子货号:M180A,包装:1 x 100u,,运保温度:-20℃】

 

 

描述:

 

pGEM® -T 载体系统是克隆PCR 产物的方便系统。pGEM®-T载体是通过EcoRV 酶切pGEM®-5Zf(+) 载体,并在两个3`末端加入胸腺嘧啶构建的。pGEM®-T 载体插入位点3`-T 突出端可极大提高PCR 产物的连接效率,因为3`-T突出端可以防止载体的自身环化,并且为某些热稳定性聚合酶产生的PCR 产物提供匹配碱基。这些聚合酶常常以模板不依赖模式在扩增产物的3` 端加上一个脱氧腺苷酸聚合物。
 

pGEM® -T 载体多克隆区T 突出端的两侧均有BstZI 酶切位点,使用BstZI 单酶消化即可释放插入片段。也可选用适当的双酶消化释放插入片段。pGEM® -T载体系统II 除了pGEM® -T 载体系统I 所有成分外,还包括JM109 感受态细胞。

pGEM®-T和pGEM®-T Easy 载体系统可用于PCR产物的克隆。这两种载体是通过 EcoRⅤ酶切pGEM®-5Zf(+)和pGEM® -T Easy载体,并在3’末端加入胸腺嘧啶构建的。插入位点3’-T突出端可提高PCR产物的连接效率,因为3’-T突出端可以防止载体的自身环化,并且为热稳定性聚合酶产生PCR产物提供匹配碱基。这些聚合酶常常以不依赖模板方式在扩增产物的3’端加上一个脱氧腺苷酸混合物。   pGEM®-T和pGEM®-T Easy高拷贝数载体包含有T7和SP6 RNA聚合酶启动子,其侧翼和多克隆位点区相接,多克隆位点区位于β半乳糖苷酶的α肽编码区内。α肽插入失活允许在指示培养基用颜色直接筛选重组克隆。另外这两个载体的多克隆位点区的限制性酶切位点适用于采用Promega企业Erase-a-Base®系统(产品目录号#E5750)产生一系列巢式缺失体。   
pGEM®-T和pGEM®-T Easy 载体的多克隆位点区含有一些这样的限制性酶切位点,采用这些酶进行单酶切消化即可释放插入片段。如pGEM®-T Easy 载体多克隆区的EcoRⅠ、BstZⅠ和NotⅠ酶切位点。而pGEM®-T 载体多克隆区只有一种这样的酶切位点BstZⅠ。这两种载体也可选用适当的双酶切消化释放插入片段。  
pGEM®-T和pGEM®-T Easy 载体含有丝状噬菌体f1复制起始子,可用于制备单链DNA 

 

 

 

产品包装目录号

pGEM®-T 载体系统Ⅰ

20个反应A3600
包括:
1.2µg                                      pGEM®-T 载体(50ng/µl) 
12µl                                        插入DNA对照(4ng/µl)
100 U                                     T4DNA连接酶
200µl                                      T4DNA连接酶的2×快速连接缓冲液
       1                                     操作手册

 

特点:

快速连接:使用2X 快速连接缓冲液(2X Rapid Ligation Buffer)可以使连接反应在室温下1 小时内完成。

蓝/ 白筛选:载体包含有T7 和SP6 RNA 聚合酶启动子,分别位于β - 半乳糖苷酶的α - 肽编码区内多克隆位点的两侧。α - 肽的插入失活允许在指示培养基上用颜色直接筛选重组克隆。

f1 复制起始位点:可用于制备单链DNA。

 

 

原厂资料:

 

The pGEM®-T Vector Systems are convenient systems to clone PCR products. The pGEM®-T Vector is prepared by cutting the pGEM®-5Zf(+) Vector with EcoRV and adding a 3´ terminal thymidine to both ends. These single 3´-T overhangs at the insertion site greatly improve the efficiency of ligation of a PCR product into the plasmid by preventing recircularization of the vector and providing a compatible overhang for ligation of PCR products generated by thermostable polymerases that add a single deoxyadenosine, in a template-independent fashion, to the 3´-ends of amplified fragments.

The multiple cloning site is flanked by recognition sites for the restriction enzyme BstZI, allowing release of the insert by a single-enzyme digestion. Alternatively, a double digestion may be used to release the insert from the vector. The pGEM®-T Vector System II contains JM109 Competent Cells in addition to all of the pGEM®-T Vector System I components.

Features - Benefits

  • Rapid Ligation: The 2X Rapid Ligation Buffer provided allows reactions to be completed in 1 hour at room temperature.
  • Blue/White Screening: T7 and SP6 RNA polymerase promoters flank a multiple cloning region within the α-peptide coding region for β-galactosidase. Insertional inactivation of the α-peptide allows recombinant clones to be directly identified by color screening on indicator plates.
  • f1 Origin of Replication: Allows preparation of single-stranded DNA.

Applications

For more information, see the Cloning and PCR chapters of the Protocols & Applications Guide.

 

 

注意事项:

 

1. 在使用pGEM®-T 和pGEM®-T Easy 载体连接时只能使用本系统提供的

Promega 企业T4 DNA连接酶。其他商用的T4 DNA连接酶可能具有外切

酶活力,造成载体的末端胸腺嘧啶被除去。

2. 2×快速连接缓冲液含有ATP,在温度波动时ATP易降解。可将缓冲液分

装成一次用量的小管,这样可避免反复冻融及经常的温度变化。

3. 在每次使用2×快速连接缓冲液时一定要用混悬器混匀。

4. 长孵育时间可增加转化子的数目,一般4℃孵育通宵可得到更多的转化子。

5.一定要使用高效率的感受态细胞(1×108cfu/µg DNA)进行转化,建议使用JM109 高效感受态细胞(产品目录号:L2001)

? 相关产品列表:

Promega 系列
序号货号  名称 规格
1M1801  T4连接酶         100U 
2M1804      T4连接酶      500U
3M1701      M-MLV              10000U 
4M1705      M-MLV             50000U 
5M5101      AMV                    300U 
6M5108      AMV             1000U  
7M7741      Pfu                      100U
8M7745      Pfu            500U  
9C1101      Olig(dt)15 Primer          20ug 
10M3001      Go-Taq                   100U  
11M3005      Go-Taq                 500U    
12M3008      Go-Taq                2500U     
13U1511      dNTP                   200μl   
14U1515      dNTP                   1000μl  
15A1360      pGEM-T easy              1.2ug   
16A3600      pGEM-T                     1.2ug 
17C1181      Random Primers              20μg  
18N2511      Recombinant RNasin           2500U 
19N2515      Recombinant RNasin      10000U  
20N2611      RNasin Plus                2500U  
21N2615      RNasin Plus              10000U   
22N2111      RNasin                   2500U     
23N2115      RNasin                  10000U   
24M1871      TdT                       300U 
25M1875      TdT                      1500U 
26M2825      CIAP                       1000U  
27M1821      CIAP           1000U            
28M2201      Klenow I      150U        
29M2206      Klenow I        500U           
30M4211      T4 DNA Polymerase  100U      
31M4215      T4 DNA Polymerase   500U          
32M4101      T4 Polynucleotide Kinase 100U          
33M4103      T4 Polynucleotide Kinase  1000U         

产品相关关键字: Promega试剂

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